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細胞增殖與細胞毒檢測試劑盒(MTT法)

更新時間:2012-01-14      點擊次數:5134

細胞增殖與細胞毒檢測試劑盒(MTT法)

產品編號 包裝 價格
130005-M 300T 185.00
130005-M1 500T 328.00
130005-M2 1000T 572.00
產品簡介
  噻唑蘭(Methylthiazoletetrazolium, MTT)是一種可接受氫離子的淡黃色唑氮鹽染料,被活細胞線粒體呼吸鏈中的琥珀酸脫氫酶和細胞色素C還原,使tetrazolium環開裂,生成水不溶的深紫色結晶產物甲簪(formazan)。死細胞因喪失琥珀酸脫氫酶活性,因此甲簪的生成量僅與活細胞數目成正比。在特定溶劑存在的情況下,甲簪可以被*溶解,借助酶標儀測定570nm波長附近的吸光度,可推算出活細胞的數量或細胞存活率。細胞增殖速度越快,則甲簪生成的量越多,吸光度越高;細胞毒性越大,則甲簪生成的量越少,吸光度越低。由于操作簡便,成本低,不污染環境,克服了傳統的同位素摻入或釋放實驗等操作復雜,成本高,對儀器設備和實驗室條件要求高,難于防護等因素,而被廣泛地用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。
    賽馳生物開發生產的細胞增殖與細胞毒檢測試劑盒(Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit) 以MTT為指示劑,在經典操作方法的基礎上,采用了*的甲簪溶解液,可以直接溶解甲簪,而無需離心去除原有的培養液,故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作誤差,具有本底低,靈敏度高,線性范圍寬,操作簡便等特點。 
包裝清單      

細胞增殖與細胞毒檢測試劑盒
130005-M
130005-M1
130005-M2
MTT染色液
6ml
10ml
10ml×2
Formazan溶解液
30ml
50ml
100ml
說明書
1 份

保存條件 
    MTT溶液-20℃保存,一年有效;Formazan溶解液室溫或-20℃保存。 
使用說明 
    1. 細胞的增殖和細胞毒實驗,一般可在96孔細胞培養板中進行。
    2. 每孔加入100微升細胞懸液。細胞的數量取決于實驗目的和培養時間。增殖實驗每孔通常加入103個以上數量的細胞;細胞毒性實驗每孔至少加入5x103個或以上數量的細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等因素確定)。
    3. 接種的細胞按照實驗需要,送入細胞培養箱進行培養。增殖實驗通常要給予0-10微升特定的藥物或生長因子進行刺激。細胞毒實驗通常要給予0-10微升抑制因子或細胞毒藥物;
    4.培養結束后,每孔加入20微升MTT溶液,在細胞培養箱內繼續孵育3-6小時;  
    5.孵育結束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃細胞培養箱內再繼續孵育,直至在鏡下觀察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時左右,紫色結晶會全部溶解。如果紫色結晶較小較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結晶較大較多,溶解的時間會略長。 
    6. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片, 560-600nm范圍的濾光片均可使用。
 

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