現(xiàn)貨genovis FabRICATOR®酶說(shuō)明書(shū)

FabRICATOR®酶

FabRICATOR酶以凍干粉形式提供，不添加防腐劑，2000和5000個(gè)單位小瓶可用于消化高達(dá)2-5 mg IgG。

FabRICATOR（IdeS）是一種半胱氨酸蛋白酶，它在鉸鏈下方的特定位置消化抗體，孵育30分鐘后產(chǎn)生F（ab’）2和Fc/2片段的同質(zhì)池。

詳細(xì)信息

FabRICATOR（IdeS）是一種酶，它在鉸鏈區(qū)下方的特定位置消化IgG，產(chǎn)生F（ab’）2和Fc/2片段的同質(zhì)池。除IgG外，沒(méi)有其他已知的底物。IgG在30分鐘內(nèi)被消化，如果培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，則不會(huì)有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。由于FabRICATOR在生理反應(yīng)條件下消化IgG，免疫反應(yīng)性得以保留。最佳活性在37°C下獲得，但消化也可以在室溫下使用延長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行。

FabRICATOR消化人類的所有亞類，以及猴子、兔子和綿羊的某些IgG。它對(duì)小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體種類，我們建議使用FabRICATOR Z。

使用FabRICATOR消化IgG，然后還原，產(chǎn)生三個(gè)25kDa大小的片段（Fd'、Fc和LC），可使用LC-MS儀器輕松分析。高精度的質(zhì)量分布能夠檢測(cè)抗體微變異，如糖基化、C-末端賴氨酸剪切、氧化和脫酰胺等。

FabRICATOR是從化膿性鏈球菌中克隆出來(lái)的，并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為37725Da。FabRICATOR是一種重組修飾形式的IdeS，由Genovis AB開(kāi)發(fā)，用于要求最高標(biāo)準(zhǔn)和一致性的生物技術(shù)應(yīng)用。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

將FabRICATOR酶冷凍干燥并通過(guò)加水進(jìn)行重組。重組后，F(xiàn)abRICATOR在+4-8°C下穩(wěn)定1個(gè)月。產(chǎn)品在環(huán)境溫度下運(yùn)輸，到達(dá)時(shí)應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。

緩沖區(qū)

以下緩沖液已在不同pH下測(cè)試與FabRICATOR消化的兼容性。注意，F(xiàn)abRICATTOR酶在pH 5.0以下不可逆失活。pH 8.0以上的消化需要延長(zhǎng)/優(yōu)化的條件。

磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）6.0–8.0

Tris緩沖區(qū)7.0–8.0

MES緩沖區(qū)5.5–6.5

HEPES緩沖液7.0–8.0

碳酸氫銨緩沖液6.0–7.0

乙酸鈉緩沖液6.0

單位定義

在37°C下，在10mM磷酸鈉、137mM NaCl、2.7mM KCl pH 7.4中孵育30分鐘時(shí)，一個(gè)單位消化≥95%的1µg人IgG。

Genovis A0-FR1-050